Estrogen deficiency influences SEC23A gene expression in the odontogenic region of incisors ­ a murine model study / A deficiência de estrógeno influencia a expressão gênica de SEC23A na região odontogênica de incisivos ­ um estudo em modelo murino

Recent scientific evidence suggests a close relationship between estrogen deficiency and vitamin D- related genes. Estrogen and vitamin D were involved with alterations in odontogenesis and tooth eruption process. Objective: The aim of the present study was to evaluate the influence of estrogen deficiency on the expression of genes related to the activation and degradation of vitamin D in the odontogenic region of incisors in a murine model. Material and Methods: This is an experimental clinical study that used female Wistar Hannover rats. The animals were randomly divided into two groups according to the intervention received: Hypoestrogenism Group ­ animals submitted to estrogen deficiency by ovariectomy surgery and Control Group ­ animals submitted to sham surgery. Surgical intervention was performed in the prepubertal period; the animals were followed throughout the pubertal period. After euthanasia, the hemimandibles were removed to evaluate the mRNA expression of the vitamin D-related genes AMDHD1, CYP24A1, NADSYN1 and SEC23A in the odontogenic region of incisors through real time PCR. Student's t test was used to compare means. Kruskal-Wallis test and Dunn's posttest were also used. The level of significance was 5%. Results: SEC23A was overexpressed in the estrogen deficiency condition in the odontogenic region (p=0.021). Conclusion: Estrogen deficiency may influence the expression of the SEC23A gene involved in the activation and degradation of vitamin D in the odontogenic region of incisors in a murine model(AU)

Evidências científicas recentes sugerem uma estreita relação entre a deficiência de estrógeno e os genes relacionados à vitamina D. O estrógeno e a vitamina D estão envolvidos com alterações na odontogênese e no processo de erupção dentária. Objetivo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência da deficiência de estrógeno na expressão de genes relacionados à ativação e degradação da vitamina D na região odontogênica de incisivos em modelo murino. Material e Métodos: Trata-se de um estudo clínico experimental que utilizou ratas Wistar Hannover fêmeas. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos de acordo com a intervenção recebida: Grupo Hipoestrogenismo ­ animais submetidos à deficiência de estrógeno pela cirurgia de ovariectomia e Grupo Controle ­ animais submetidos à cirurgia simulada. A intervenção cirúrgica foi realizada no período pré-púbere; os animais foram acompanhados durante todo o período puberal. Após a eutanásia, as hemimandíbulas foram removidas para avaliar a expressão de mRNA dos genes AMDHD1, CYP24A1, NADSYN1 e SEC23A, relacionados à vitamina D, na região odontogênica de incisivos por meio de PCR em tempo real. O teste t de Student foi utilizado para comparar as médias. Também foram utilizados o teste de Kruskal-Wallis e o pós-teste de Dunn. O nível de significância foi de 5%. Resultados: SEC23A foi superexpresso na condição de deficiência de estrógeno na região odontogênica (p=0,021). Conclusão: A deficiência de estrógeno pode influenciar a expressão do gene SEC23A envolvido na ativação e degradação da vitamina D na região odontogênica de incisivos em modelo murino (AU)

O que as revisões sistemáticas Cochrane mostram sobre a vitamina D? / What do Cochrane systematic reviews show about vitamin D?

Contextualização: A vitamina D tem sido utilizada na prática clínica e amplamente divulgada na mídia como opção preventiva ou terapêutica em muitas doenças esqueléticas e não esqueléticas, mas sua efetividade, em muitos casos, é ainda incerta. Objetivos: Sumarizar as evidências de revisões sistemáticas da Cochrane, referentes à efetividade da vitamina D para tratamento e prevenção de doenças. Métodos: Trata-se de overview de revisões sistemáticas Cochrane. Procedeu-se à busca na Cochrane Library (2023), sendo utilizado o descritor MeSH "VITAMIN D". Todas as revisões sistemáticas de ensaios clínicos foram incluídas. O desfecho primário de análise foi a melhora clínica, a redução dos sintomas ou a prevenção da doença. Resultados: 22 estudos foram incluídos, totalizando 284.404 participantes. Há evidência de baixa qualidade relativa a benefícios da suplementação da vitamina D na gestação para mãe e recém-nascido, não sendo encontrados, até o momento, benefícios para outras condições avaliadas. Discussão: Nenhuma intervenção mostrou efetividade com evidência de boa qualidade. Embora haja descrição de benefícios na redução do risco de pré-eclâmpsia, diabetes gestacional, baixo peso do bebê ao nascimento, redução no risco de hemorragia grave pós-parto e redução de fraturas em idosos (quando associada à suplementação de cálcio), esses achados têm evidência limitada e carecem de melhor análise no futuro próximo, a partir de novos ensaios clínicos. Conclusão: Atualmente, não há suporte com bom nível de evidência para a maioria das intervenções com suplementação de vitamina D, sendo recomendada a realização de novos ensaios clínicos para melhor robustez dos achados desses estudos.

Efectividad del ejercicio más suplementación con vitamina D3 sobre la masa y fuerza muscular de pacientes con artritis reumatoidea / Effectiveness of exercise and vitamin D3 on muscle mass and strength in rheumatoid arthritis

Introducción. La artritis reumatoidea es una enfermedad autoinmune con un proceso inflamatorio crónico de las articulaciones y con una respuesta catabólica incrementada que predispone a una elevada pérdida de la masa muscular. Objetivo. Evaluar la efectividad de un programa de ejercicios de resistencia más suplementación con vitamina D3 en la movilidad, la masa y la fuerza muscular de pacientes con artritis reumatoidea que acuden a la consulta de medicina física y rehabilitación. Métodos. Ensayo clínico controlado y aleatorizado realizado en 30 pacientes distribuidos equitativamente en tres grupos: grupo control, grupo con ejercicios durante 10 semanas y un grupo con ejercicios durante 10 semanas más suplementación con 2.000 UI de vitamina D3. Las variables fueron evaluadas al inicio del estudio y a las 10 semanas de iniciada la intervención. Resultados. La edad media de los participantes fue 57,73 años y la gran mayoría (93.3%) eran mujeres. En el primer ítem de la evaluación de la escala SPPB (test de equilibrio) se observó un promedio inicial de 3,5 y final de 3,7, en el segundo ítem (test de velocidad de marcha) el promedio inicial fue de 2,8 y el final, de 3,3, y en el tercer ítem (test de levantarse de la silla) el promedio inicial fue de 1,1 y el final, de 1,6, con un resultado significativo final entre ellos (p<0,001). La medición de la masa mediante ultrasonido evidenció un valor significativo en el grupo de ejercicios más suplementación con vitamina D3. Conclusión. La intervención durante 10 semanas de ejercicios de fuerza más suplementación con vitamina D3 (2.000 UI) produce una mejoría sobre los ítems de la escala SPPB y sobre la masa muscular de los músculos bíceps braquial y recto anterior femoral, lo cual podría incidir sobre la disminución del riesgo de caídas en pacientes con artritis reumatoidea.

Introduction. Rheumatoid arthritis is an autoimmune disease with a chronic inflammatory process of the joints and an increased catabolic response that predisposes to a high loss of muscle mass. Objective. To evaluate the effectiveness of a resistance exercise program plus supplementation with vitamin D3 on the mobility, and the muscle mass and strength of patients with rheumatoid arthritis who attend the consultation of physical medicine and rehabilitation. Methods. Randomized controlled clinical trial conducted in 30 patients equitably distributed into three groups: control group, group with exercises for 10 weeks and a group with exercises for 10 weeks plus supplementation with 2,000 IU of vitamin D3. The variables were evaluated at the beginning of the study and 10 weeks after the start of the intervention. Results. The mean age of the participants was 57.73 years and the vast majority of them (93.3%) were women. In the first item of the evaluation in the SPPB scale (balance test) an initial average of 3.5 and a final average of 3.7 was observed, in the second item (gait speed test) the initial average was 2.8 and the second was 3.3, and in the third item (standing up from a chair) the initial average was 1.1, and the final was 1.6, with a significant final result between them (p<0.001). The measurement of the mass using ultrasound evidenced a significant value in the group of exercises plus supplementation with vitamin D3. Conclusion. The intervention during 10 weeks of strength exercises plus supplementation with vitamin D3 (2,000 IU) produces an improvement in the items of the SPPB scale and in the muscle mass of the biceps brachii and rectus femoris, which might have an impact on the reduction of the risk of falls in patients with rheumatoid arthritis.

Normal physiological functions in two animal species with highly different vitamin d status compared to that of humans / Funciones fisiológicas normales en dos especies animales con estatus de vitamina d muy diferentes del actual en seres humanos

Mole rats live in permanent darkness, in networks of underground tunnels (which extend up to 1 km in the subsoil), excavated with their incisors, in warm and semi-arid areas of South Africa. Mole rats have an unusually impoverished vitamin D3 status with undetectable and low plasma concentrations of 25- hydroxyvitamin D3 and 1α,25-dihydroxyvitamin D3, respectively. They express 25-hydroxylase in the liver and 1-hydroxylase and 24-hydroxylase in their kidneys. The presence of specific receptors (VDR) was confirmed in the intestine, kidney, Harderʼs glands and skin. In spite of their poor vitamin D3 status, the apparent fractional intestinal absorption of calcium, magnesium and phosphate was high, always greater than 90%. Oral supplementation with cholecalciferol to mole rats did not improve the efficiency of gastrointestinal absorption of these minerals. Mole ratsdo not display the typical lesion of rickets: hypertrophic and radiolucent growth cartilages. Histological studies reported normal parameters of trabecular and cortical bone quality. Marmosets (monkeys of the New World) are not hypercalcaemic, eventhough they exhibit much higher levels of 25-hydroxyvitamin D3, 1α,25-dihydroxyvitamin D3 and parathyroid hormonethan that of rhesus monkeys and humans. Fed a high vitamin D3 intake (110 IU/day/100 g of body weight), a fraction of the experimental group was found to display osteomalacic changes in their bones: distinct increases in osteoid surface, relative osteoid volume, and active osteoclastic bone resorption. These findings suggest that some marmosets appears to suffer vitamin D-dependent rickets, type II. The maximum binding capacity of the VDR or the dissociation constant of VDR1α,25(OH)2D3 complex of mole rats and New World monkeys are distinctly different of VDR isolated from human cells. Health status of those species appears to be adaptations to the mutations of their VDR. Though rare, as mutations may occur at any time in any patient, the overall message of this review to clinicians may be: recent clinical studies strongly suggests that the normality of physiological functions might be a better indicator of the health status than the serum levels of vitamin D metabolites. (AU)

Las ratas topo viven en la oscuridad permanente, en redes de túneles subterráneos excavadas con sus incisivos (que se extienden hasta 1 km en el subsuelo), en áreas cálidas y semiáridas de Sudáfrica. Las ratas topo tienen un estatus de vitamina D3 inusualmente empobrecido con concentraciones plasmáticas indetectables de 25-hidroxivitamina D3 y bajas de 1α, 25-dihidroxivitamina D3. Poseen 25-hidroxilasa en el hígado y 1-hidroxilasa y 24-hidroxilasa en sus riñones. La presencia de receptores específicos (VDR) ha sido confirmada en el intestino, el riñón, las glándulas de Harder y la piel. A pesar de su pobre estatus de vitamina D3,la absorción fraccional intestinal aparente de calcio, magnesio y fosfato fue alta, siempre superior al 90%. La suplementación oral con colecalciferol a las ratas topo no mejoró la eficacia de la absorción gastrointestinal de estos minerales. No muestran la lesión típica del raquitismo: cartílagos de crecimiento hipertróficos y radiolúcidos. Varios estudios histológicos confirman los hallazgos radiológicos y se informan parámetros normales de la calidad ósea trabecular y cortical. Los titíes (monos del Nuevo Mundo) exhiben calcemias normales con niveles más elevados de 25-hidroxivitamina D3, 1α,25-dihidroxivitamina D3 y hormona paratiroidea que los monos rhesus y los seres humanos. Un tercio de un grupo de titíes alimentados con una alta ingesta de vitamina D3 (110 I/día/100 g de peso corporal) exhibió cambios osteomalácicos en sus huesos: aumento en la superficie osteoide, volumen osteoide y activa reabsorción osteoclástica. Estos hallazgos sugieren que una fracción de la población de titíes padece raquitismo dependiente de vitamina D, tipo II. Debido a mutaciones ocurridas hace millones de años, las máximas capacidades de ligamiento del VDR o los valores de la constante de disociación del complejo VDR-1α,25(OH)2D3 de las ratas topo o monos del Nuevo Mundo son muy diferentes de los verificables en receptores aislados de células humanas actuales. El mensaje de esta revisión a los médicos clínicos podría ser: varios estudios clínicos recientes indican que la normalidad de las funciones fisiológicas de un paciente es un mejor indicador de su salud que los niveles séricos de los metabolitos de la vitamina D. (AU)

25 (OH) D3 levels, incidence and recurrence of different clinical forms of benig paroxysmal positional vertigo / Níveis de 25 (OH) D3, incidência e recorrência de diferentes formas clínicas de vertigem posicional paroxística benigna

Abstract Introduction Benign paroxysmal positional vertigo is the most common cause of dizziness in the general population. It is a condition with potential impact of reduced levels of vitamin D on its recurrent attacks. Objectives The aim of this study was to measure the serum levels of 25-hydroxyvitamin D3 (25-OH D3) in patients with benign paroxysmal positional vertigo and determine whether there is a difference in the serum levels of vitamin D3 between patients with and without recurrence, as well as between the different clinical forms of benign paroxysmal positional vertigo. Methods The study included 40 patients who came to the regular medical examination, diagnosed with posterior canal-benign paroxysmal positional vertigo based on the positive Dix-Hallpike's test. All patients underwent Epley manoeuvre after the diagnosis. Patients were classified according to current guidelines for levels of vitamin D3 in the serum in three groups: the deficiency, insufficiency and adequate level. Results The average serum level of 25-OH D3 among respondents was 20.78 ng/mL, indicating a lack or insufficiency of the aforementioned 25-OH D3. According to the levels of 25-OH D3, most patients suffer from deficiency (47.5%). 7 (17.5%) respondents had adequate blood level of 25-OH D3, and 14 (35%) respondents suffer from insufficiency. A significant difference was not found in the serum level of 25-OH D3 between patients with and without benign paroxysmal positional vertigo recurrence. There was a significant difference in the serum levels of 25-OH D3 in comparison to the clinical form of the disease. Lower 25-OH D3 values were found in patients with canalithiasis compared to those with cupulolithiasis. Conclusions There were no significant differences in the vitamin D3 serum level in patients with and without recurrence. The study showed a low level of serum vitamin D3 in most patients, indicating the need for supplemental therapy.

Resumo Introdução Vertigem posicional paroxística benigna é a causa mais comum de tonturas na população em geral. É uma condição no qual níveis reduzidos de vitamina D podem ter um potencial impacto para o desenvolvimento de crises recorrentes. Objetivos O objetivo desse estudo foi medir os níveis séricos de 25-hidroxivitamina D3 (25-OH D3) em pacientes com vertigem posicional paroxística benigna e determinar se há diferença nos níveis séricos de vitamina D3 entre pacientes com e sem recorrência, bem como entre as diferentes formas clínicas de vertigem posicional paroxística benigna. Método O estudo incluiu 40 pacientes submetidos a exame médico regular, diagnosticados com vertigem posicional paroxística benigna de canal posterior baseado no resultado positivo do teste de Dix-Hallpike. Todos os pacientes foram submetidos à manobra de Epley após o diagnóstico. Os pacientes foram classificados de acordo com as diretrizes atuais para os níveis de vitamina D3 sérica em três grupos: deficiência, insuficiência e nível adequado. Resultados O nível sérico médio de 25-OH D3 entre os indivíduos avaliados foi de 20,78 ng/mL, indicando falta ou insuficiência desta vitamina. De acordo com os níveis de 25-OH D3, a maioria dos pacientes apresentou deficiência (47,5%). Sete indivíduos (17,5%) entrevistados tinham nível sanguíneo adequado de 25-OH D3 e 14 (35%) apresentavam insuficiência. Não foi encontrada diferença significativa no nível sérico de 25-OH D3 entre pacientes com e sem recidiva de vertigem posicional paroxística benigna. Houve uma diferença significativa nos níveis séricos de 25-OH D3 de acordo com a forma clínica da doença. Baixos níveis de 25-OH D3 foram mais encontrados em pacientes com canalitíase em comparação com aqueles com cupulolitíase. Conclusões Não houve diferenças significativas no nível sérico de vitamina D3 em pacientes com e sem recorrência. O estudo mostrou um baixo nível de vitamina D3 sérica na maioria dos pacientes, indicando a necessidade de terapia suplementar.

Efectividad del alendronato más calcio y vitamina D, comparado con calcio y vitamina D para la prevención de la fractura de cadera / Hip fractures prevention: Effectiveness with alendronate plus calcium+vitamin D compared with calcium +vitamin (control group

Resumen:Objetivo:establecer la efectividad del alendronato, comparado con un grupo control, para prevenir la fractura de cadera y perfilar la mortalidad a corto plazo.Métodos:estudio observacional, analítico, con todos los pacientes atendidos en la Seguridad Social con tratamiento con alendronato, calcio y vitamina D (grupo A), o con calcio y vitamina D (grupo control, C), que recibieron tratamiento continuo por 1 año como mínimo, y lo mantuvieron durante el periodo de observación y seguimiento, 3 años o hasta que ocurrió el evento de fractura, según el registro institucional por diagnóstico y la condición de egreso (vivo o fallecido).Resultados:en total se incluyó una muestra de 10395 pacientes que cumplieron con el tratamiento continuo previo y durante el seguimiento a 3 años; n= 5 570 (53,58%) expuestos al alendronato 70 mg semanal junto con calcio y vitamina D y como control, n= 4 825 (46,42%) que recibieron calcio y vitamina D. Durante el seguimiento a 3 años de ambos grupos, se registró un total de 108 fracturas de cadera; el evento ocurrió en el 1,08% de los pacientes que recibieron alendronato y en el 0,99% del control. La efectividad del tratamiento con alendronato (junto con calcio y vitamina D) para prevenir la fractura de cadera, se estableció en el 98,92%, similar a lo registrado para el grupo control (99,01%). La mortalidad aguda por fractura de cadera registrada en un tiempo máximo de 35 días de hospitalización (Cuadro 2), en el grupo alendronato alcanzó el 11,66% y todas eran mujeres. En el grupo control, la mortalidad aguda llegó al 22,91% y un 72,72% eran mujeres.Conclusiones:no hubo diferencias significativas en los grupos evaluados en número de fracturas ni mortalidad. Los adultos mayores resultaron más vulnerables para sufrir este evento y para un desenlace fatal a corto plazo.

Abstract:Objective:To establish the effectiveness of alendronate, compared to a control group, in preventing hip fracture and outline the short-term mortality.Methods:Observational, analytical study, with all patients treated at the Social Security, for at least 1 continuous year, with alendronate, calcium and vitamin D (group A) and control group (C) with calcium and vitamin D, follow up by three years or until the event occurred (hip fracture) according to the institutional record for diagnosis and discharge status (alive or deceased). Subgroup analyzes> 65 years.Results:The total sample included 10395 patients that followed the pretreatment and the 3-year follow up. Group A n = 5.570 (53.58%) exposed to weekly 70mg alendronate with calcium and vitamin D, 95% female, mean age 69 years, median treatment period before event 749 days. Control group C n = 4.825, that received calcium and vitamin D, 89% female, 66 years old and 775 days of treatment, respectively. During the studied period (three years) 108 fractures were registered, 60 in group A (1.08%) and 48 in group C (0.99%). The effectiveness of the treatment with alendronate (with calcium and vitamin D) to prevent hip fracture was established in the 98.92%, similar to that registered for the control group (99.01). The acute mortality for hip fracture, registered in a maximum time of 35 days of hospitalization (table 2), in the alendronate group reached the 11.66% and were all women. In the control group acute mortality reached 22.91% and 72.72% were women.Conclusions:Alendronate showed similar effectiveness to control to prevent hip fractures. Older adults were more vulnerable to suffer this event and a short-term fatal outcome.

Sobre la prevalencia de hipovitaminosis D en Argentina

Entre 1987 e inicios del corriente año, se han publicado 10 trabajos informando la prevalencia del déficit de vitamina D en nuestro país. Los trabajos incluyeron personas de ambos sexos, neonatos, niños, adultos jóvenes, adultos mayores sanos y adultos institucionalizados, residentes en el sur, centro y norte del país. El promedio ponderado de prevalencia del déficit de 25(HO)D3 en esos trabajos es de 43.3% (436/1007 personas). La prevalencia anotada podría ser menor que la real ya que es desconocido si el millar de personas estudiadas tienen una estratificación etaria y de lugar de residencia, representativa de la población nacional. Ante las evidentes dificultades para la realización de un estudio de esa extensión, se sugiere que los futuros trabajos de investigación establezcan cuál es la magnitud de la exposición solar en verano suficiente como para obviar (o no) la suplementación oral en invierno y definir el éxito de los esquemas de administración, teniendo en cuenta la controversia corriente entre dosificación y nivel plasmático óptimo. En ambos casos, se sugiere tomar como punto final alguna de las funciones fisiológicas afectadas por la hormona, aludidas en este artículo.

Between 1987 and the date of the present issue, 10 reports have been published on the prevalence of the vitamin D deficit in Argentina. These studies were done investigating new born babies, children, adolescents, and healthy and institutionalized adults, living in southern, middle or northern cities of Argentina. The weighed prevalence of vitamin D deficit in those reports was 43.3% (436/1007). This figure may be lower than reality because it is not known whether the stratification (age and location of residence) of the sum of samples agree with that of the national population. Taking into account the obvious difficulties in carrying out such a research two areas for further research are suggested: a) an investigation on the solar exposure in summer needed to obviate (or not) the oral supplementation of vitamin D in winter, b) to determine the success of the schema of administration taking into account the current controversy between dose and optimum plasma levels of 25(HO)D3. In both instances, the end point should include some of the physiological functions alluded to in this editorial.

Níveis séricos de vitamina D3 em mulheres com diabetes mellitus tipo 2 / Serum levels of vitamin D3 in women with type 2 diabetes mellitus

Objetivo ­ Verificar os níveis de vitamina D3 e correlacioná-los com os níveis de glicemia de jejum e de hemoglobina glicada em pacientes com diabetes mellitus tipo 2 em tratamento medicamentoso por hipoglicemiantes orais ou insulina. Métodos ­ Trata-se de um estudo transversal, retrospectivo, realizado em consultório particular com prontuários de pacientes do sexo feminino com diabetes mellitus tipo 2 em uso de hipoglicemiantes, onde avaliou-se a correlação entre vitamina D3 e glicemia de jejum e hemoglobina glicada, sendo excluídas pacientes gestantes, lactantes, portadores de doença renal e hepática. Pontos de coorte da vitamina D3: deficiência/insuficiência ≤ 30 ng/mL; suficiência ≥ 30 ng/mL. Critérios diagnósticos para diabetes: níveis de glicemia de jejum ≥ 126mg/dL; hemoglobina glicada ≥ 6,5%. Resultados ­ Os portadores de diabetes mellitus tipo 2 apresentaram níveis insuficientes de vitamina D3 em 87% de casos. Conclusões ­ Não houve correlações lineares significativas entre vitamina D3 e glicemia de jejum e nem entre vitamina D3 e hemoglobina glicada em portadores de diabetes mellitus tipo 2 no presente estudo. Níveis baixos de vitamina D3 sugere suplementação de vitamina D3 em doses elevadas.

Objective ­ To verify the levels of vitamin D3 and correlate them with the levels of fasting glucose and glycated hemoglobin in patients with type 2 diabetes mellitus in drug treatment, by oral hypoglycemic agents or insulin. Methods ­ It was a cross-sectional, retrospective research, held in private practice with charts of female patients diagnosed with type 2 diabetes mellitus in hypoglycemic, which were evaluated the correlation between vitamin D3 and fasting glucose and glycated hemoglobin. Were excluded pregnant patients, lactating, people suffering from kidney and liver diseases. Clinical categories of vitamin D3: deficiency/insufficiency ≤ 30 ng/mL; sufficiency ≥ 30 ng/mL. The diagnostic criteria for diabetes: levels of fasting glucose ≥ 126mg/dL; glycated hemoglobin ≥ 6.5 %. Results ­ Patients with type 2 diabetes mellitus had insufficient levels of vitamin D3 in 87 % of cases. Conclusions ­ There were not significant linear correlations between vitamin D3 and fasting glucose or between glycated hemoglobin and vitamin D3 in patients with type 2 diabetes mellitus in this research. Low levels of vitamin D3 suggests vitamin D3 supplementation in high doses.

Utilização da vitamina D3 e seus metabólitos na alimentação de frangos de corte sobre parâmetros imunológicos e morfometria intestinal / Use of vitamin D3 and its metabolites in broiler feed on immunological parameters and intestinal morphometry

Os efeitos da suplementação da vitamina D3 e de seus diferentes metabólitos foram avaliados na resposta imune e na morfometria intestinal de frangos de corte. Foram utilizados 952 frangos de corte de um dia de idade, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, com quatro tratamentos, sete repetições e 34 aves por unidade experimental. Os tratamentos foram constituídos por quatros diferentes fontes de vitamina D3: colecalciferol (D3), 25-hidroxicolecalciferol (25(OH)D3),1,25dihidroxicolecalciferol (1,25(OH)2D3) e 1α-hidroxicolecalciferol (1α(OH)D3). As diferentes fontes foram incluídas na dieta, fornecendo 2000 e 1600 UI de vitamina D, nas fases pré-inicial, inicial e de crescimento, respectivamente. O peso relativo do intestino delgado diferiu entre os tratamentos aos 7, 21 e 42 dias e o peso relativo do fígado somente aos 42 dias de idade. Os demais órgãos e parâmetros imunológicos avaliados (peso dos órgãos linfóides, reação de hipersensibilidade cutânea basofílica, avaliação da atividade de macrófagos, dosagem de nitrito e perfil heterofilo: linfócito foram similares entre os animais alimentados com os diferentes metabólitos. Houve efeito (P<0,05) dos diferentes metabólitos da vitamina D3 sobre o comprimento dos vilos de jejuno e íleo aos sete dias, diferindo entre os animais alimentados com 1,25(OH)2D3 e 1α(OH)D3 para jejuno e 1,25(OH)2D3 e vitamina D3 para íleo (P<0,05). Para as demais fases não foi observado influência (P>0,05) dos tratamentos. Os parâmetros imunológicos não foram afetados pelos diferentes metabólitos de vitamina D. Os diferentes metabólitos de vitamina D afetaram positivamente a morfometria intestinal na altura de vilo na fase inicial, sendo os melhores resultados obtido pelos animais alimentados com 1,25(OH)2D3, contudo os parâmetros imunológicos foram similares entre os metabólitos estudados.

The aim of this experiment was to evaluate the effect of different vitamin D metabolites on immune response and intestine morphometry of broiler chickens. We used 952 1-day-old chicks, male Cobb, distributed into a completely randomized design with four treatments, seven replications and 34 birds each. There were evaluated four different metabolites of vitamin D: D3, 25(OH)D3, 1,25(OH)2D3 and 1α(OH)D3, providing 2000 and 1600 IU/kg feed of vitamin D in initial and growth period, respectively. The different metabolites of vitamin D did not affect the relative weight of the organs except for the weight of the intestine and liver at 21 and 42 days. There was a significant effect (P<0.05) of the different metabolites of D3 vitamin on the villi length of jejunum and ileum at 7 days, between animals fed with 1,25(OH)2D3 and 1α(OH)D3 to the jejunum and 1,25(OH)2D3 and vitamin D3 to the ileum (P<0.05). There were no differences (P>0.05) for weight of lymphoid organs, cutaneous basophil hypersensitivity reaction, macrophage activity assessment, measurement of nitric oxide and heterophil profile: lymphocyte. The different sources of vitamin D affect the intestine morphometrics on the villi length in the initial phase, but the effect was not observed in other phases. The immunological parameters were not affected by metabolites of vitamin D.

Determinação de 25-hidroxivitamina D2 e D3 em plasma por CLAE-DAD / Determination of 25-hidroxy-vitamin D2 and D3 in plasma by HPLC-DAD

INTRODUÇÃO: O interesse pela vitamina D nos últimos anos teve aumento significativo. Estudos epidemiológicos realizados têm demonstrado um crescente aumento da deficiência de vitamina D entre a população. O marcador diagnóstico de escolha para determinar os níveis de vitamina D é a concentração de 25-hidroxivitamina D (25(OH)D), com suas frações D2 (25(OH)D2) e D3 (25(OH)D3). OBJETIVO: Desenvolver uma metodologia analítica empregando cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD) para a determinação de 25(OH)D3 e 25(OH)D2 em plasma. MATERIAIS E MÉTODOS: 25(OH)D3 e 25(OH)D2 foram extraídos das amostras de plasma com hexano, utilizando-se dodecafenona como padrão interno (PI). Utilizou-se coluna analítica ACE 5 C18 com partículas de 5 µm e dimensões de 150 × 4,6 mm, fase móvel metanol-água (80:20; v/v) e quantificação em 265 nm. RESULTADOS: A exatidão foi entre 98,4 e 107,5%. A precisão intraensaios esteve entre 6,5% e 9,2% para 25(OH)D3 e entre 3,7% e 8,7% para 25(OH)D2. A precisão interensaios esteve entre 2,9% e 6% para 25(OH)D3 e entre 4% e 4,5% para 25(OH)D2. O limite inferior de quantificação foi 10 ng/ml. As concentrações encontradas em amostras de 32 pacientes idosos estiveram entre 10,1 e 32,4 ng/ml, caracterizando deficiência de vitamina D nesse grupo. DISCUSSÃO O método foi capaz de quantificar 25(OH)D2 e 25(OH)D3 com uma preparação de amostra relativamente simples e rápida. O método foi seletivo, com separação adequada dos metabólitos e do padrão interno e sem presença de interferentes. CONCLUSÃO: O método desenvolvido apresenta desempenho analítico adequado e pode ser aplicado em condições clínicas.

INTRODUCTION: The interest in vitamin D has increased significantly in recent years. Epidemiological studies conducted over the past 25 years have shown a steady increase in vitamin D deficiency. The diagnostic marker of choice to determine vitamin D levels is the concentration of 25-hidroxy-vitamin D (25(OH)D) in the fractions D2 (25(OH)D2) and D3 (25(OH)D3). OBJECTIVE: To develop an analytical method using high-performance liquid chromatography with diode-array detection (HPLC-DAD) for the determination of 25(OH)D2 and 25(OH)D3 in plasma. MATERIALS AND METHODS: 25(OH)D3 and 25(OH)D2 were extracted from plasma samples with hexane and dodecaphenone was used as internal standard. The separation was performed in an ACE 5 C18 column, with particle size of 5 µm (4,6 × 150 mm), mobile phase methanol-water (80:20, v/v) and quantification at 265 nm. RESULTS: Accuracy was in the range of 98.4 to 107.5%. Intra-assay precision was between 6.5 and 9.2% for 25(OH)D3 and 3.7 and 8.7 for 25(OH)D2. Inter-assay precision was between 2.9 and 6% for 25(OH)D3 and 4 and 4.5 for 25(OH)D2. The limit of quantification was 10 ng/l. Concentrations of 25(OH)D3 in samples from 32 elderly patients were between 10.1 and 32.4 ng/ml, characterizing vitamin D deficiency in this group. DISCUSSION: The method allowed the quantification of 25(OH)D2 and 25(OH)D3. Furthermore, the sample preparation was relatively simple and fast. The method was selective with an adequate separation of metabolites and internal standard with no interfering substances. CONCLUSION: Not only did the developed method show suitable analytical performance, but it may also be applied in clinical conditions.

¿Es equivalente la suplementación diaria con vitamina D2 o vitamina D3 en adultos mayores? / Is daily supplementation with vitamin D2 equivalent to daily supplementation with vitamin D3 in the elderly?

Tanto la equivalencia entre colecalciferol (D3) y ergocalciferol (D2), como las dosis y forma de administración de ambos, son actualmente un tema controvertido. El objetivo de este estudio fue comparar la efectividad de 800 UI/día de D2 (gotas) y D3 (comprimidos) para alcanzar niveles adecuados de 25 hidroxivitamina D (25OHD) (= 30 ng/ml). Veintiún mujeres posmenopáusicas que vivían en la Ciudad de Buenos Aires, edad promedio ( ± DS) 77.1 ± 6.8 años fueron incluidas y asignadas en forma aleatoria a uno de los siguientes grupos: GD2 (n = 13): 800 UI (gotas) y GD3 (n = 8): 800 UI (comprimidos). Se midió 25OHD sérica (RIA-DIASORIN) basal y a los 7, 28 y 45 días del estudio. Basalmente, 19 de las 21 mujeres presentaron niveles de deficiencia de 25(OH)D (< 20 ng/ml): GD2: 14.0 ± 4.8 y GD3: 13.2 ± 4.9 (NS). Se observó en el día 7 un incremento del ~25% solo en GD3 y un aumento significativo al final del estudio en ambos grupos, sin alcanzar los valores adecuados de 25OHD (GD2: 17.4 ± 5.5 vs. GD3:22.9 ± 4.6 ng/ml p < 0.001). La administración por 45 días de 800 UI de vitamina D3 fue más efectiva que D2 para incrementar los niveles de 25OHD, aunque ambas fueron insuficientes para alcanzar niveles adecuados de 25OHD (= 30 ng/ml).

The equivalence of cholecalciferol (D3) and ergocalciferol (D2) as well as their corresponding doses and administration route remain controversial to date. The aim of this study was to compare the effectiveness of daily supplementation with 800 IU of D2 (drops) and D3 (pills) on 25-hydroxivitamin D (25OHD) levels (= 30 ng/ml). Twenty-one ambulatory postmenopausal women from Buenos Aires City with a mean ( ± SD) age of 77.1 ± 6.8 years were included. The participants were randomly assigned to one of the following groups: GD2 (n = 13): 800 IU (drops) and GD3 (n = 8): 800 IU (pills). Serum 25OHD levels were measured (RIA-DIASORIN) at baseline, and at 7, 28 and 45 days. Nineteen out of twenty one women showed deficient levels of 25OHD at baseline (< 20 ng/ml): GD2: 14.0 ± 4.8 ng/ml and GD3: 13.2 ± 4.9 ng/ml (NS). Whereas only GD3 exhibited an increase (~25%) at 7 days, both groups showed a significant increase at the end of the study. However, neither attained adequate 25OHD levels (GD2: 17.4 ± 5.5 vs. GD3:22.9 ± 4.6 ng/ml; p < 0.001). Administration of 800 IU of vitamin D3 during 45 days was more effective than D2 in increasing 25OHD, but both failed to achieve adequate levels of 25OHD (= 30 ng/ml). but neither succeeded in achieving adequate levels of 25OHD (= 30 ng/ml).

Manifestaciones clínicas y cambios en la química sérica y tisular en ratas tratadas con vitamina D3 (calciferol) / Clinical signs and changes in serum and tissue chemistry in rats treated with vitamin D3 (calciferol)

En el presente trabajo se estudió el efecto de la administración subcutánea de 250, 500 y 750 μg (10.000, 20.000 y 30.000 UI, respectivamente) de vitamina D3 (calciferol)/día durante 8 días, sobre las concentraciones séricas de vitamina D3 y de 25-hidroxivitamina D3 (25-OH-D3) y sobre las concentraciones séricas y tisulares de Ca, Zn, Cu y Fe en 45 ratas macho Wistar, de 12 semanas de edad y con pesos entre 180 y 200 gramos. El grupo control estuvo integrado por 15 ratas Wistar sanas, con género, edad y peso similares a los animales tratados. La administración del calciferol a dosis altas produjo una hipervitaminosis D que se caracterizo por un aumento en el contenido sérico de la vitamina D3 y de 25-OH-D3, diversos signos clínicos (por ejemplo, anorexia, pérdida marcada de peso, diarreas sanguinolentas, conjuntivitis bilateral y muerte), hipercalcemia, hipocincemia, hipercupremia, hipoferremia y una alteración en la distribución tisular de Ca, Zn, Cu y Fe en comparación con los controles no tratados. La hipercalcemia y la inflamación son un hallazgo prominente en la hipervitaminosis D. La inflamación o la infección inducen cambios sistémicos, conocidos colectivamente como la respuesta de fase aguda. Entre las variadas alteraciones que produce esta respuesta encontramos hipoferremia, hipocincemia e hipercupremia. Es probable que estas respuestas estén mediadas, en parte, por la producción y liberación de citocinas como la interleucina 1, interferones (IFN-alfa), la interleucina 6 (Il-6) y el factor de necrosis tumoral (TNF). El desarrollo de la hipoferremia durante la inflamación requiere de hepcidina, un péptido rico en enlaces disulfuro, regulador del metabolismo del hierro, sintetizado en el hígado en respuesta a la liberación de Il-6 durante la inflamación/infección. En conclusión, nuestros resultados proporcionan evidencias que la administración de altas dosis de vitamina D, a corto plazo, determina diversos signos clínicos, produce un marcado aumento de las concentraciones séricas de la vitamina D3 y de 25-OH-D3 y una marcada alteración en las concentraciones séricas y tisulares de Ca, Zn, Cu y Fe, que dependen de las dosis inyectadas de vitamina D.

In the present work the effect of subcutaneous administration of 250, 500 and 750 ìg (10.000, 20.000 and 30.000 IU, respectively) of vitamin D3 (calciferol) daily for eight days, on serum concentrations of vitamin D3 and 25- hydroxyvitamin D3 (25-OH-D3) and on serum and tissue concentrations of Ca, Zn, Cu and Fe in 45 white male Wistar rats, aged 12 weeks and weighing 180-200 g, have been studied. The group control was integrated by 15 healthy rats with similar characteristics (strain, gender, age and weight) that treated animals. Administration of high doses of calciferol produced a hypervitaminosis D characterized by a significant (p3 and 25-OH-D3, diverse clinical signs (such as, anorexia, marked loss of body weight, bloody diarrhea, bilateral conjunctivitis, and death), hypercalcemia, hypozincaemia, hypercupremia, hypoferraemia and an alteration in the tissue distribution of Ca, Zn, Cu and Fe as compared with untreated controls. Hypercalcemia and inflammation are prominent findings in hypervitaminosis D. Inflammation or infection induce systemic changes, collectively known as the acute phase response. Among the varied alterations that together produce this response are hypoferraemia, hypozincaemia and hypercupremia. It is likely that these responses are mediated, in part, by production and release of cytokines such as interleukin 1, interferons (IFN-alpha), interleukin 6 (Il-6) and tumor necrosis factor (TNF). The development of hypoferraemia during inflammation requires hepcidin, an iron regulatory hormone, a disulfide-rich peptide, produced in the liver in response to the release of Il-6 during inflammation/ infection. In conclusion, our results provide evidence that short-term administration of high doses of vitamin D determined diverse clinical signs and produced a marked increase of serum vitamin D3 and 25-OH-D3 and a marked alteration in the serum and tissue concentrations of Ca, Zn, Cu, and Fe. These changes depend on the doses given of vitamin D.

Controversias en la medición de 25 (OH) Vitamina D: comparación de dos metodologías / Controversies in measuring 25 (OH) Vitamin D: comparison of two methodologies

Introducción: Los métodos utilizados para la medición de Vitamina D tienen varios aspectos metodológicos sin definir: método de referencia, trazabilidad con estándar internacional, especificidad, etc.; situación que genera grandes controversias entre los resultados obtenidos. Objetivo: Comparar los resultados de la medición de Vitamina D con dos inmunoensayos de diferente especificidad y estandarización, y su impacto en la interpretación clínica de los mismos en individuos no tratados y tratados con Vitamina D2 o D3. Materiales y Métodos: Para la comparación de los métodos se consideraron dos grupos: G1 (95 muestras de suero de pacientes algunos de los cuales recibían Vitamina D2, otros Vitamina D3 y otros sin medicación) y G2 (40 muestras de suero luego de excluir a los 55 pacientes que recibían Vitamina D2). Resultados: Al analizar las medias de los resultados obtenidos por cada método, se hallaron diferencias altamente significativas (p<0.0001) en G1 y diferencias significativas (p< 0.0038) en G2. Cuando se compararon los resultados de EQLIA vs RIE, no se halló correlación (r:-0,00671; p=0,9483) en G1 pero sí en G2. (r=0.898, p<0.0000). Si bien en G1 se halló concordancia entre los resultados de los métodos se observa gran dispersión de los mismos (media 20,8 ng/ml). En cambio en el G2 se observa una mejor concordancia entre ellos (media 6.4 ng/ml). Conclusiones: Esta comparación de métodos nos permitió identificar las dos situaciones críticas que debemos considerar cuando nos solicitan la medición de Vitamina D: primero la condición del paciente en cuanto a si ha sido o no suplementado con Vitamina D y en ese caso si se le administró D2 o D3 y segundo: el método a emplear para su determinación. Las discrepancias entre los resultados de vitamina D obtenidos por diferentes metodologías impactarán en la utilidad clínica del informe emitido por el laboratorio y consecuentemente en la interpretación y decisión médica.

Introduction: The methods used for vitamin D measurement have several methodological aspects still not defined, such as reference method, traceability of international standard, specificity, etc, which generates great discrepancies between the results obtained. Objective: To compare the results of vitamin D measurements obtained with two different immunoassays of different specificity and standardization, and their impact on clinical interpretation in patients treated and not treated with vitamin D2 or D3. Materials and Methods: Two groups are considered for comparison of the methods: G1 (95 serum samples from patients who were receiving vitamin D2, vitamin D3 or no medication) and G2 (40 serum samples after excluding the 55 patients who received vitamin D2). Results: There are great differences between the samples measured by both assays. We found highly significant differences between means in G1 (p <0.0001) and significant differences in G2 (p < 0.0038). No correlation was observed between EQLIA vs. RIA in the G1 (r = -0.00671, p = 0.9483) but good correlation in G2. (r = 0.898, p < 0.0000). Although ECLIA was in agreement with RIA, in G1 the results of the methods shows a wide dispersion around the mean of the difference 20.8 ng / ml. In contrast, in G2 there is a better match between results (mean of the difference 6.4 ng/ml). Conclusions: This comparison of methods allowed us to identify two critical situations to consider when measuring vitamin D: first, whether the patient has been supplemented or not with Vitamin D, and in that case, if he/she has been given D2 or D3, and secondly, the method used for measurement. Discrepancies between the results of vitamin D measurements obtained by different methodologies will impact on the clinical usefulness of the report issued by the laboratory, and consequently in the interpretation and medical decision.

La suplementación de vitamina D3 sobre la calidad de la carne en bovinos mestizos a pastoreo / Effect of vitamin D3 supplementation on meat quality in grazing bovine crossbred

Se evalúo la aplicación de sobredosis de vitamina D3 en dos niveles (6x106 y 10x106 de UI) sobre un grupo de 60 novillos mestizos, Indicus × Continental, de 2 años de edad, distribuidos aleatoriamente en tres tratamientos compuestos por 20 animales: Testigo (T1), 6x106 UI de vitamina D3 (T2) y 10x106 UI de vitamina D3 (T3). Se midió la resistencia al corte con Warner-Bratzler (WB) en crudo y cocinado, determinaciones de Ca en plasma y músculo. Para el análisis sensorial se realizaron dos evaluaciones: luz blanca (Apariencia total (AT) y color (CO)); y luz roja: color (CO), olor (OL), sabor (SA), sensación grasa (SG), terneza (TE), jugosidad (JU) y cantidad de tejido conectivo (TC). Los datos fueron evaluados mediante un análisis de varianza utilizando un modelo lineal general. En consumo de vitamina D3 por el animal (ca) no hubo diferencia significativa (P>0,01) entre los tratamientos. Para la concentración de calcio en plasma sanguíneo los grupos suplementados con vitamina D3 presentaron entre un 25 y 40 por ciento más de calcio en plasma sanguíneo que el grupo no suplementado. En textura no hubo diferencia significativa entre los tratamientos en crudo y cocido. Para la concentración de calcio en músculo se encontró diferencia, siendo la sobredosis de 10x106 UI de vitamina la que aumentó en una mayor proporción aproximadamente un 60 por ciento con respecto a la sobredosis de 6x106 UI de vitamina y al control. Se encontraron diferencias significativas (P<0,01) para CO, OL, SA, TE y TC. Se concluye que la adición ante-mortem de 6x106 UI de vitamina D3 mezclado en la ración diaria de alimento aumenta la concentración de calcio en plasma sanguíneo, disminuye el WB en crudo y cocido y mejora significativamente las características organolépticas del músculo Longissimus lumborum.

Sixty large framed, Indicus × Continental, crossbred beef 2-year steers grazing in a tropical dry forest environment, were used to investigate the effect of supplementing diets with various levels of vitamin D3 (VITD) to provide 0, 6, and 10 million IU/(steer×d) for 8 d before slaughter on plasma (PCa) and Longissimus lumborum muscle Ca2+ (MCa) concentrations, texture analysis (TX), and sensorial analysis of the organoleptic qualities, in which appearance (A), odor (O), flavor (F), juiciness (J), amount of connective tissue (CT), and tenderness (T) were evaluated. Steers were slaughtered using an approved humane technique. A randomly subsample of five steers of the three individual VITD treatments (n = 15) was chosen for meat quality and palatability analyses. Following a 24-h chilling period -4°C, carcasses (a randomly selected subsample n=15) were ribbed, one strip loin of Longissimus lumborum (LL) muscle was removed from each carcass. Steaks were vacuum-packed. The data were analyzed in a completely randomized design using the General Linear Models procedures. Warner-Bratzler shear force (WB) was measured on strip loin at 7 d postmortem. Steaks for WB and sensory evaluation were thawed to 2°C. Blood plasma Ca2+ and muscle Ca concentration of cattle treated with VITD were higher (P < 0.01) than controls. VITD supplementation did not (P> 0.01) affect TX. Sensory traits of appearance, odor, flavor, juiciness, connective tissue, and tenderness were improved (P< 0.01) by all VITD treatments in LL steaks. Treatment with VITD will effectively improve tenderness in grazing crossbred indicus x Continental cattle in tropical conditions.

Validación de una metodología por cromatografía líquida de alta eficiencia para la determinación simultánea de vitaminas A, D3 y E en inyectables de uso veterinario / x

Se presentan en este artículo los resultados del desarrollo y de la validación de una metodología analítica para la cuantificación simultánea de vitamina A palmitato, vitamina D3 y vitamina E acetato en inyectables de uso pecuario. El procedimiento consiste en una separación por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE) en fase inversa empleando como fase móvil una mezcla de acetonitrilo, metanol, agua (45:50:2.5), una columna C18 a 45 ºC y detección a una longitud de onda de 280 nm. Se encontró que el método es selectivo, lineal y preciso. Estas características junto con su sencillez hacen que el método sea adecuado y conveniente para el objetivo propuesto. La robustez de la metodología fue también investigada. El método validado se aplicó para la determinación de las vitaminas en tres productos inyectables del mercado colombiano con registro sanitario del Instituto Colombiano Agropecuario (ICA).

Neste artigo se apresentam os resultados do desenvolvimento e validação da metodologia analítica para a determinação simultânea de palmitato de vitamina A, vitamina D3 e vitamina E em injetáveis para uso de acetato na pecuária. O procedimento consiste na separação cromatográfica por cromatografia liquida de alta eficiência (CLAE) em fase reversa, utilizando como fase móvel mistura de acetonitrila, metanol, água (45:50:2.5), coluna C18 a 45 ºC e detecção em comprimento de onda de 280 nm. O método mostrou-se seletivo, linear e preciso. As características e a facilidade de execução do método indicam que ele é adequado e conveniente para o objetivo proposto. A robustez do método também foi pesquisada. O método validado foi aplicado para a determinação de vitaminas em três produtos injetáveis do mercado colombiano com registro no ICA (Instituto Colombiano Agropecuário).